Uvod: V tem priročniku so predstavljeni naslednji primeri kemijskih kemikalij, ki jih je treba obravnavati v okviru kemijske zakonodaje.
Kako deluje tankoslojna kromatografija?
Priprava.
Izdelava kromatograma.
Vzemite en plastični ali stekleni kozarec, vlijte 10-15 ml vode, 4-5 kapljic alkoholne raztopine joda. Mešajte 7-10 minut. Odcedite vodo. Jod se izloči v vodi na straneh kozarca. Kozarec postavite v posodo.
Faktor zadrževanja
Po končani separaciji se posamezne spojine pojavijo kot vertikalno ločene pege. Vsaka točka ima faktor zadrževanja (Rf), ki je enak razdalji, ki se je premaknila, glede na celotno razdaljo, ki jo je prepotovalo topilo. Formula Rf je Rf = razdalja, ki jo prepotuje vzorec, / razdalja, ki jo prepotuje topilo.
Razprava o rezultatih
metamfetamin - 0,55
mefedron - 0,65
Zaključek.
Kromatografija se uporablja za ločevanje mešanic snovi na njihove sestavine. Vse oblike kromatografije delujejo po enakem načelu. V tem članku bom to metodo pojasnil z opredelitvijo Rf amfetamina metamfetamina in mefedrona.
Kromatografske plošče imajo stacionarno fazo (trdno snov ali tekočino na trdni podlagi) in mobilno fazo (tekočino ali plin). Mobilna faza teče skozi stacionarno fazo in s seboj nosi sestavine zmesi. Različne komponente se gibljejo različno hitro. Razloge za to si bomo ogledali v nadaljevanju strani. Pri tankoslojni kromatografiji se uporablja natanko tako, kot je navedeno - s tanko, enakomerno plastjo silikagela ali aluminijevega oksida, prevlečenega na kosu stekla, kovine ali toge plastike. Silikagel (ali aluminijev oksid) je stacionarna faza. Stacionarna faza za tankoslojno kromatografijo pogosto vsebuje tudi snov, ki fluorescira v UV-svetlobi ali jodovi komori - iz razlogov, ki jih boste videli pozneje. Mobilna faza je primerno tekoče topilo ali mešanica topil.
Kromatografske plošče imajo stacionarno fazo (trdno snov ali tekočino na trdni podlagi) in mobilno fazo (tekočino ali plin). Mobilna faza teče skozi stacionarno fazo in s seboj nosi sestavine zmesi. Različne komponente se gibljejo različno hitro. Razloge za to si bomo ogledali v nadaljevanju strani. Pri tankoslojni kromatografiji se uporablja natanko tako, kot je navedeno - s tanko, enakomerno plastjo silikagela ali aluminijevega oksida, prevlečenega na kosu stekla, kovine ali toge plastike. Silikagel (ali aluminijev oksid) je stacionarna faza. Stacionarna faza za tankoslojno kromatografijo pogosto vsebuje tudi snov, ki fluorescira v UV-svetlobi ali jodovi komori - iz razlogov, ki jih boste videli pozneje. Mobilna faza je primerno tekoče topilo ali mešanica topil.
Silikagel je oblika silicijevega dioksida (silicijevega dioksida). Silicijevi atomi so povezani z atomi kisika v velikansko kovalentno strukturo. Na površini silikagela pa so silicijevi atomi povezani s skupinami -OH. Tako so na površini silikagela vezi Si-O-H namesto vezi Si-O-Si. Diagram prikazuje majhen del površine silicijevega dioksida. Površina silikagela je zelo polarna in lahko zaradi -OH skupin tvori vodikove vezi z ustreznimi spojinami v okolici ter Van-der-Waalsove disperzijske sile in dipolno-dipolno privlačnost.
Potrebujete:
1. brizgo za 5 ml х 4
2. Plastični kozarec za testiranje urina х 4
3. Velike plastične posode za hrano (ali ena velika čaša in plastična posoda) х 2
4. TLC plošča s plastjo silikagela 5x10 cm (veliko ploščo lahko odrežete s škarjami)
5. Topila etil acetat, metanol, heksan (lahko nadomestite z ogljikovim tetrakloridom), vodna raztopina amonijaka 10 % ali več, alkoholna raztopina joda
6. Mehak svinčnik, ravnilo in klešče
Ne pozabite na rokavice in respirator, poskuse izvajajte v prezračevanem prostoru.
1. brizgo za 5 ml х 4
2. Plastični kozarec za testiranje urina х 4
3. Velike plastične posode za hrano (ali ena velika čaša in plastična posoda) х 2
4. TLC plošča s plastjo silikagela 5x10 cm (veliko ploščo lahko odrežete s škarjami)
5. Topila etil acetat, metanol, heksan (lahko nadomestite z ogljikovim tetrakloridom), vodna raztopina amonijaka 10 % ali več, alkoholna raztopina joda
6. Mehak svinčnik, ravnilo in klešče
Ne pozabite na rokavice in respirator, poskuse izvajajte v prezračevanem prostoru.
Izdelava kromatograma.
1. Pripraviti morate tekočo raztopino etil acetat:metanol:raztopina amoniaka 85:10:5. Za 10 ml morate vzeti 8,5 ml etil acetata, 1 ml metanola in 0,5 ml raztopine amoniaka ter jih premešati.
2. S to raztopino očistite ploščo s silikagelom. Ploščo postavimo v raztopino, ki mora biti globoka 3-4 mm v veliki čaši (kot na sliki 1). Za udobno rokovanje lahko uporabite pinceto. Pomembno: plošče ne omočite z vodo, ker se bo pokvarila. Ploščo morate držati v raztopini, dokler sprednja stran topila ne doseže zgornjega roba plošče.
3. Začeli bomo s preprostim primerom. Imamo štiri snovi: amfetamin(A), metamfetamin (L), kofein(K) in mefedron(M).
Za ta poskus morate pridobiti brezplačno bazo drog. V stekleni (plastični) kozarec dajte 10-15 mg vzorca (nekaj grudic), čisto dve kapljici vodne raztopine amonijaka. Nato vlijte 3-4 kapljice heksana ali ogljikovega tetraklorida in pretresajte eno minuto. Prosta baza vaše droge se razredči v organski plasti.
Priprava
4. Sedaj jo morate položiti na kromatografsko ploščo, ki ste jo pripravili prej. Vzemite iglo iz injekcijske brizge in jo s kleščami prerežite, kot je prikazano v primeru. Dobiti morate raven rob.
Vzemite čisto in posušeno ploščico ter s svinčnikom narišite črto ~5-6 mm od spodnjega roba. Vse oznake na ploščici, ki prikazujejo prvotni položaj kapljice, morajo biti prav tako v svinčniku. Če je bilo vse to narejeno s črnilom, se bodo barvila iz črnila premikala tudi pri razvoju kromatograma. Označite štiri pike z enako razdaljo med njimi. Konec odrezane igle potopite v organsko plast prve raztopine narkotika. S konico igle se dotaknite plošče in naredite majhno piko s premerom 3-4 mm, počakajte, da se posuši, in postopek ponovite desetkrat. Za druge snovi ponovite faze 2 in 3.
Pogosta napaka: ne naredite velikega mastnega madeža, ker lahko vaša snov med poskusom prekrije druge snovi.
5. Ko so lise prostih baz suhe, ploščo postavimo v plitvo plast topila v pokrito čašo. Pomembno je, da je nivo topila pod črto, na kateri je madež. Počakajte, da linija topila doseže 4-5 mm pred zgornjim robom plošče, in jo izvlecite. Nato s svinčnikom narišite črto na sprednjo črto topila. Osušite jo na zraku.
6. Kromatogram dajte v zaprto posodo (kot je druga čaša, prekrita z urnim steklom, ali velike plastične posode) skupaj z nekaj kristali joda. Jodovi hlapi v posodi reagirajo s točkami na kromatogramu. Snovi, ki vas zanimajo, se lahko pokažejo kot obarvane lise. Sledite jim s svinčnikom in v središče vsake pege narišite pike.
Uporabite lahko tudi UV svetilko z valovno dolžino 254 in 365 nm.
Kako pripraviti jodovo komoro.Pogosta napaka: ne naredite velikega mastnega madeža, ker lahko vaša snov med poskusom prekrije druge snovi.
5. Ko so lise prostih baz suhe, ploščo postavimo v plitvo plast topila v pokrito čašo. Pomembno je, da je nivo topila pod črto, na kateri je madež. Počakajte, da linija topila doseže 4-5 mm pred zgornjim robom plošče, in jo izvlecite. Nato s svinčnikom narišite črto na sprednjo črto topila. Osušite jo na zraku.
Vzemite en plastični ali stekleni kozarec, vlijte 10-15 ml vode, 4-5 kapljic alkoholne raztopine joda. Mešajte 7-10 minut. Odcedite vodo. Jod se izloči v vodi na straneh kozarca. Kozarec postavite v posodo.
Faktor zadrževanja
Po končani separaciji se posamezne spojine pojavijo kot vertikalno ločene pege. Vsaka točka ima faktor zadrževanja (Rf), ki je enak razdalji, ki se je premaknila, glede na celotno razdaljo, ki jo je prepotovalo topilo. Formula Rf je Rf = razdalja, ki jo prepotuje vzorec, / razdalja, ki jo prepotuje topilo.
:
Vrednost Rf se lahko uporabi za identifikacijo spojin zaradi svoje edinstvenosti za vsako spojino. Ko primerjamo dve različni spojini pod enakimi pogoji, je spojina z večjo vrednostjo Rf manj polarna, ker se ne drži na stacionarni fazi tako dolgo kot polarna spojina, ki bi imela manjšo vrednost Rf. Na vrednosti Rf in ponovljivost lahko vplivajo številni različni dejavniki, kot so debelina plasti, vlaga na plošči TLC, nasičenost posode, temperatura, globina mobilne faze, vrsta plošče TLC, velikost vzorca in parametri topila. Ti učinki običajno povzročijo povečanje vrednosti Rf. Vendar se v primeru debeline plasti vrednost Rf zmanjša, ker se mobilna faza počasneje premika po plošči navzgor.Pri poskusu sem namesto pričakovanih štirih točk dobil tri. Ponovitev poskusa je pokazala, da se kofein ne eluira z raztopino etil cetata, metanola in amoniaka v razmerju 85:10:5. Eksperimentalno je bilo potrjeno, da je ta raztopina primerna za eluiranje drog, kot so amfetamin, metamfetamin in mefedron.
Rf preučevanih drog.
Amfetamin - 0,53metamfetamin - 0,55
mefedron - 0,65
Pojasnilo.
Dobil sem dve ploščici z rezultati. Dve izmerjeni razdalji med začetno točko in sredino obkrožene točke. Amfetaminska točka je bila na prvi plošči 42 mm, na drugi plošči pa 49 mm od začetne črte, sprednja črta topila je bila 85 oziroma 86 mm. Rf1=42/85=0.49, Rf2=49/86=0.52. Nato sem izračunal aritmetično sredino 0,53. Enake izračune sem opravil za druge snovi.
Dobil sem dve ploščici z rezultati. Dve izmerjeni razdalji med začetno točko in sredino obkrožene točke. Amfetaminska točka je bila na prvi plošči 42 mm, na drugi plošči pa 49 mm od začetne črte, sprednja črta topila je bila 85 oziroma 86 mm. Rf1=42/85=0.49, Rf2=49/86=0.52. Nato sem izračunal aritmetično sredino 0,53. Enake izračune sem opravil za druge snovi.
Zaključek.
Kot kaže poskus, lahko izmerite Rf svojega zdravila in ga primerjate z znano snovjo na isti plošči. Za preverjanje Rf naredite piko brez podlage za vašo drogo in 1-4 pike drugih drog. Če so pike na enaki razdalji od začetne črte, gre verjetno za isto snov. Prav tako, če iz vaše droge dobite več lis, imate verjetno mešanico snovi. Nekatere droge imajo več lis, ker so mešanica droge in stranskih produktov sinteze. Kljub temu jih lahko primerjate z drugimi drogami z uporabo tankoslojne kromatografije.
Attachments
Last edited by a moderator:
