Εισαγωγή
Αναφέρεται μια απλή μέθοδος υδατικής εκχύλισης για την απομόνωση και την ταυτοποίηση της ψιλοκίνης από τα μανιτάρια Psilocybe Cubensis. Η μέθοδος αυτή χρησιμοποιεί μια αποφωσφορυλίωση του φωσφορικού εστέρα στην ψιλοκίνη, η οποία διευκολύνει τη μεγαλύτερη απόδοση προϊόντος και απλοποιεί την ταυτοποίηση. Η ψιλοκίνη που εξάγεται με αυτή τη μέθοδο είναι επαρκώς συμπυκνωμένη και απαλλαγμένη από συν-προσμίξεις, ώστε να επιτρέπει την ταυτοποίηση με φασματοσκοπία υπερύθρου και αέρια χρωματογραφία/φασματομετρία μάζας.
Επίσης αντιπροσωπεύεται η εκχύλιση ψιλοκυβίνης με χρήση αλκοόλης, συμπυκνωμένη διαδικασία για την εκχύλιση ψιλοκυβίνης. Η ψιλοκυβίνη μετατρέπεται σε ψιλοκίνη στον ανθρώπινο οργανισμό.
Επίσης αντιπροσωπεύεται η εκχύλιση ψιλοκυβίνης με χρήση αλκοόλης, συμπυκνωμένη διαδικασία για την εκχύλιση ψιλοκυβίνης. Η ψιλοκυβίνη μετατρέπεται σε ψιλοκίνη στον ανθρώπινο οργανισμό.
Ψιλοκυβίνη και ψιλοκίνη
Οι τρυπταμίνες είναι μία από τις τέσσερις κατηγορίες παραισθησιογόνων ινδόλων σε περισσότερες από 20 κατηγορίες ινδολικών ενώσεων που περιλαμβάνουν περίπου 600 αλκαλοειδή. Με την ψιλοκίνη και την ψιλοκυβίνη έχει διεξαχθεί σημαντική έρευνα από την απομόνωσή τους από τους Hofmann et. al. Έχουν χρησιμοποιηθεί διάφορες τεχνικές εκχύλισης για την απομόνωση της ψιλοκίνης και της ψιλοκυβίνης από περισσότερα από δύο δωδεκάδες είδη μανιταριών τεσσάρων γενών (Conocybe. Panaeolus, Psilocybe, Stropharia). Οι τεχνικές που χρησιμοποιούν μεθανόλη συν-εκχυλίζουν άλλες ενώσεις, όπως ουρία, εργοστερόλη, εργοστερικό υπεροξείδιο, α,α-τρεαλόζη, βαεοκυστίνη και νορβαεοκυστίνη. Προς το παρόν, δεν έχει αναφερθεί μια χρήσιμη διαδικασία υδατικής εκχύλισης για την ψιλοκίνη και την ψιλοκυβίνη.
Η αποφωσφορυλίωση της ψιλοκυβίνης σε ψιλοκίνη in vivo έχει τεκμηριωθεί καλά και θεωρείται ότι ευθύνεται για το μεγαλύτερο μέρος ή το σύνολο της δράσης της στο κεντρικό νευρικό σύστημα. Ημετατροπή της ψιλοκυβίνης σε ψιλοκίνη είναι επίσης απαραίτητη για την υδατική εκχύλιση με οργανικούς διαλύτες, λόγω της πολύ χαμηλής λιποδιαλυτότητας της ψιλοκυβίνης.
Η συγκέντρωση και η ανιχνευσιμότητα της ψιλοκυβίνης και της ψιλοκυβίνης εξαρτώνται από διάφορες μεταβλητές, μεταξύ των οποίων.
Η αποφωσφορυλίωση της ψιλοκυβίνης σε ψιλοκίνη in vivo έχει τεκμηριωθεί καλά και θεωρείται ότι ευθύνεται για το μεγαλύτερο μέρος ή το σύνολο της δράσης της στο κεντρικό νευρικό σύστημα. Ημετατροπή της ψιλοκυβίνης σε ψιλοκίνη είναι επίσης απαραίτητη για την υδατική εκχύλιση με οργανικούς διαλύτες, λόγω της πολύ χαμηλής λιποδιαλυτότητας της ψιλοκυβίνης.
Η συγκέντρωση και η ανιχνευσιμότητα της ψιλοκυβίνης και της ψιλοκυβίνης εξαρτώνται από διάφορες μεταβλητές, μεταξύ των οποίων.
- Η απουσία γλυκόζης, η οποία εμποδίζει την παραγωγή ψιλοκυβίνης.
- Χαμηλά επίπεδα σουξινικού αμμωνίου, τα οποία θα δώσουν φτωχές αποδόσεις ψιλοκυβίνης.
- Το μέσο καλλιέργειας, το οποίο απαιτεί pH μικρότερο του 7.
- Χρόνος: η μέγιστη παραγωγή ψιλοκυβίνης εμφανίζεται την έβδομη ημέρα μετά το φύτρωμα, ενώ η μέγιστη παραγωγή του μυκηλίου επιτυγχάνεται την ένατη ημέρα.
- Θερμοκρασία: πλήρης απώλεια της ψιλοκίνης και της ψιλοκυβίνης θα συμβεί σε συγκομισμένα μανιτάρια που παραμένουν σε θερμοκρασία δωματίου για μεγάλο χρονικό διάστημα.
- Οξείδωση: η ψιλοκίνη θα οξειδωθεί σε ένα μπλε προϊόν (πιθανόν να ευθύνεται για το μπλε χρώμα στα τέσσερα γένη που περιέχουν ψιλοκίνη και ψιλοκυβίνη).
Λόγω της αυξανόμενης δημοτικότητας αυτών των μανιταριών και των κιτ που διατίθενται από εκδόσεις προσανατολισμένες στα φάρμακα για την καλλιέργεια μανιταριών που περιέχουν ψιλοκίνη και ψιλοκυβίνη σε κοπριά αγελάδων, έχει αναπτυχθεί μια απλή διαδικασία εκχύλισης σε νερό που εξάγει λογικά καθαρή ψιλοκίνη από ώριμα μανιτάρια.
Εξοπλισμός και γυάλινα σκεύη.
- Μορφοποιητής και γουδοχέρι.
- Ποτήρι ζέσεως 250 ml.
- Υδρόλουτρο με θερμαντήρα.
- Θερμόμετρο.
- Χωνί.
- Φίλτρα καφέ.
Αντιδραστήρια.
- Αποξηραμένα μανιτάρια.
- 100 mL Αραιό οξικό οξύ (ξύδι, AcOH 5-9% aq.).
- ~30 mL παγωμένο οξικό οξύ (AcOH).
- ~ 50 g υδροξείδιο του αμμωνίου (NH4OH).
- ~ 300 mL Αποσταγμένο νερό (H2O).
- 100 mL διαιθυλαιθέρας (Et2O).
- ~ 30 g θειικό νάτριο (Na2SO4) άνυδρο.
Πειραματικό
Ένα αντιπροσωπευτικό δείγμα 2 έως 10 g αποξηραμένων μανιταριών αλέθεται σε λεπτή σκόνη με γουδί και γουδοχέρι. Η σκόνη αναμιγνύεται με 100 ml αραιού οξικού οξέος σε ποτήρι ζέσεως 250 ml. Το pH ρυθμίζεται εκ νέου σε pH 4 με παγωμένο οξικό οξύ. Μετά από παραμονή 1 ώρας, το ποτήρι ζέσεως τοποθετείται σε υδατόλουτρο βρασμού για 8 έως 10 λεπτά ή έως ότου η εσωτερική θερμοκρασία του μίγματος οξέος φθάσει τους 70 °C. Το ποτήρι αφαιρείται και ψύχεται σε θερμοκρασία δωματίου υπό τρεχούμενο νερό. Το μείγμα οξέος διαχωρίζεται από τη σκόνη μανιταριών με αναρρόφηση (ή απλή διήθηση) με χρήση υαλοβάμβακα. Το διήθημα φέρεται σε pH 8 με πυκνό υδροξείδιο του αμμωνίου (NH4OH) και εκχυλίζεται γρήγορα με δύο μερίδες διαιθυλαιθέρα 50 ml. Για την αποφυγή γαλακτώματος πρέπει να χρησιμοποιείται ήπια ανάμιξη αντί για ανακίνηση. Ο αιθέρας ξηραίνεται πάνω σε θειικό νάτριο, διηθείται και εξατμίζεται χωρίς εφαρμογή θερμότητας.
Η ακατέργαστη ψιλοκίνη εμφανίζεται ως πρασινωπό υπόλειμμα. Ηανακρυστάλλωση από χλωροφόρμιο/επτάνιο (1:3) δίνει λευκούς κρυστάλλους.
Η ακατέργαστη ψιλοκίνη εμφανίζεται ως πρασινωπό υπόλειμμα. Ηανακρυστάλλωση από χλωροφόρμιο/επτάνιο (1:3) δίνει λευκούς κρυστάλλους.
Αποτελέσματα και συζήτηση
Η μέθοδος αυτή επιτρέπει την ταχεία απομόνωση της ψιλοκίνης από παραισθησιογόνα μανιτάρια με συνεκχύλιση τόσο της ψιλοκίνης όσο και της ψιλοκυβίνης. Το αραιό οξικό οξύ είναι ένας εξαιρετικός διαλύτης για το σκοπό αυτό, επειδή και οι δύο ενώσεις είναι πολύ διαλυτές στο οξικό οξύ11 και πολύ λίγες άλλες ουσίες που παρεμβαίνουν εκχυλίζονται, είναι πολύ πιθανό να συν-εκχυλίζονται κάποιες άλλες ενώσεις αλλά να απομακρύνονται από την ψιλοκίνη κατά την εκχύλιση με αιθέρα από την υδατική βάση. Η ψιλοκυβίνη αποφωσφορυτώνεται πλήρως σε ψιλοκίνη με θέρμανση του όξινου εκχυλίσματος. Μετά την προσθήκη της βάσης, η εκχύλιση σε αιθέρα πρέπει να γίνεται αμέσως λόγω της αποσύνθεσης της ψιλοκίνης σε pH μεγαλύτερο του 7. Τα στάδια εκχύλισης και αποφωσφορυλίωσης παράγουν λογικά καθαρή ψιλοκίνη από μικρή ποσότητα υλικού μανιταριών.
Εκχύλιση ψιλοκυβίνης με αλκοόλη
Εξοπλισμός και αντιδραστήρια.
- 750mL αλκοόλης (50% αιθανόλη είναι εντάξει, αλλά όσο υψηλότερη τόσο το καλύτερο)
- Μείγμα ζελατίνης, γεύση κατά βούληση
- Φίλτρα καφέ (2 ανά εκχύλιση)
- 2 δοχεία (1 για το διπλό βρασμό και ένα για τη ζελατίνη)
- Χωνί(α)
- Κύπελλα για σφηνάκια
- 28 γραμμάρια ξηρών μανιταριών Cracker (ή 1 γραμμάριο ανά ποτήρι για σφηνάκια, χρησιμοποίησα 12,3 γραμμάρια APE + 16 γραμμάρια pins & aborts)
- 2 βάζα Quart/Pint
- Κύπελλο μέτρησης
- Συσκευή άλεσης (γουδί + στίφτη ή μπλέντερ, έχω διαπιστώσει ότι το μπλέντερ είναι το πιο εύκολο)
1. Αλέστε τα μανιτάρια σας.
Ένα μπλέντερ χρειάζεται περίπου 2 λεπτά & ένα Mortar + Pestle χρειάζεται περίπου 30 λεπτά.
Αφήστε τη "σκόνη" των μανιταριών σας να κατακαθίσει για λίγα λεπτά, αν χρησιμοποιείτε μπλέντερ.
2. Αδειάστε τη σκόνη μανιταριών σας στο βάζο σας (εγώ χρησιμοποίησα βάζα τεσσάρων τετραγώνων).
Χρησιμοποίησα 28 γραμμάρια, τα οποία αντιστοιχούν σε 200 mL ψιλοκομμένα
3. Ρίξτε το αλκοόλ της επιλογής σας πάνω από τα αποξηραμένα και ψιλοκομμένα μανιτάρια, θέλετε αρκετό αλκοόλ για να καλύψει τη σκόνη συν λίγο.
Θέλετε να ανακατέψετε τα μανιτάρια λίγο με το αλκοόλ με ένα κουτάλι ή ένα μαχαίρι.
4. Γεμίστε την κατσαρόλα σας με λίγο νερό. Θέλετε αρκετό για να καλύψετε όλο το αλκοόλ στο βάζο.
Διαδικασία
1. Τοποθετήστε το βάζο μέσα στο νερό στην κουζίνα σε υψηλή θερμοκρασία.2. Παρακολουθήστε προσεκτικά το βάζο για να πλησιάσει σε σημείο βρασμού. Ανακατεύω απαλά το νερό γύρω από το βάζο & το μείγμα μέσα στο βάζο για να εξασφαλίσω ομοιόμορφη κατανομή της θερμότητας. Μετά από 15 λεπτά βρασμού.
Το μείγμα θα έρθει σε βρασμό αρκετά γρήγορα. Επομένως, θα ρυθμίσετε τη θερμότητα στη σόμπα από Υψηλή σε Χαμηλή σε Μέτρια-Χαμηλή. Η τελευταία ρύθμιση εξαρτάται απλώς από τη σόμπα. Χρησιμοποίησα ένα θερμόμετρο με μακρύ στέλεχος για να παρακολουθώ τις θερμοκρασίες.
3. Βράστε το μείγμα για 1 ώρα.
4. Πετάξτε το μείγμα από το βάζο & σε 2 φίλτρα καφέ- χρησιμοποίησα ένα χωνί και γι' αυτό. Επίσης, θέλετε να φορέσετε κάποιο προστατευτικό ένδυμα για τα χέρια, καθώς το βάζο είναι εξαιρετικά ΖΕΣΤΟ.
3. Βράστε το μείγμα για 1 ώρα.
4. Πετάξτε το μείγμα από το βάζο & σε 2 φίλτρα καφέ- χρησιμοποίησα ένα χωνί και γι' αυτό. Επίσης, θέλετε να φορέσετε κάποιο προστατευτικό ένδυμα για τα χέρια, καθώς το βάζο είναι εξαιρετικά ΖΕΣΤΟ.
5. Πιέστε & συμπιέστε απαλά το μείγμα, αναγκάζοντας το πλούσιο σε Ψιλοκυβίνη υγρό σας να περάσει μέσα από το φίλτρο.
Αν χρησιμοποιείτε τα γυμνά σας χέρια, ίσως να θέλετε να τα καλύψετε με λαστιχένια γάντια, καθώς άρχισα να σκοντάφτω λίγο την τελευταία φορά που το έκανα αυτό.
Μετά από 1 πλήρη εκχύλιση.
Πιέστε+Συμπυκνωμένα μανιτάρια σε βάζο τεσσάρων γραμμαρίων.
6. Επαναλάβετε όλα τα παραπάνω βήματα άλλη μια φορά για να επιτύχετε πλήρη εκχύλιση.
Στο φίλτρο και πάλι.
Σύνολο υγρού.
237 ml (8 ουγκιές).
Μπορείτε να προσθέσετε περισσότερο οινόπνευμα αν βγει λιγότερο από όσο θα θέλατε, ή να διπλοβράσετε λίγο περισσότερο για να το μειώσετε.
7. Αφήστε το υγρό στο βάζο.
7. Αφήστε το υγρό στο βάζο.
Προετοιμασία της ζελατίνης
Αναλογίες:a. Είχα 237 mL (8 oz) υγρού ψιλοκυβίνης. Ως εκ τούτου, ήθελα ένα ωραίο μείγμα ζεστού & κρύου νερού.
b. Μετρήστε 237 mL (8 oz) νερού και βάλτε το στην κατάψυξη για 15 λεπτά.
c. Χρησιμοποίησα 355 mL (12 oz) ζεστό νερό + 89 mL (3 oz) ξηρό μείγμα ζελατίνης. ΔΕΝ περίμενα να βράσει το νερό, αλλά απλώς να είναι αρκετά ζεστό ώστε να διαλυθεί η σκόνη.
Ανάμειξη υγρών
1. Ρίξτε το ζεστό νερό στο βάζο του τετραγώνου με το αλκοόλ+.2. Ρίξτε το κρύο νερό στο βάζο του τετραγώνου.
3. Ανακατέψτε λίγο
4. Αδειάστε το σε φλιτζάνια.
Εναλλακτικός τρόπος ανάμειξης για ΑΚΡΙΒΗ δοσολογία ανά σφηνάκι
1. Μειώστε το μείγμα μανιταριών σε ακριβή ποσότητα υγρού.2. Βάλτε το υγρό των μανιταριών σας σε σύριγγα ή διαβαθμισμένο κύλινδρο για ακριβείς μετρήσεις.
3. Ανακατέψτε το ζεστό νερό ζελατίνης σας + το κρύο νερό και ρίξτε το ομοιόμορφα σε κάθε ποτήρι.
4. Ψεκάστε/χύνετε το υγρό μανιταριών σας σε κάθε ποτήρι ομοιόμορφα.
Τώρα έχετε Χ ποσότητα σφηνάκια ζελέ με ακριβή δοσολογία.
Σφηνάκια με φρέσκο νερό.
Παγώστε για 24 ώρες και στη συνέχεια απολαύστε τα όποτε θέλετε.
Θα σας συνιστούσα να ξεκινήσετε με 1 σφηνάκι και να δείτε πώς δίνεται η δόση. Θα πρέπει να έχετε μια γρήγορη έναρξη (20 λεπτά) και πιο έντονο ταξίδι για λιγότερο χρόνο (περίπου 3 ώρες).
Last edited:
